Während die mundbräunenden Mäuse mit msx1-/-Osr2-/-Verbindung eine nahezu normale Morphogenese der ersten Molaren zeigten, sie haben weder die überzähligen Zähne noch die zweiten und dritten Molaren entwickelt, im Gegensatz zu den Osr2-/-Einzelmutanten 94, was darauf hindeutet, dass osr2 neben der Musterung der bukolingualen Achse des sich entwickelnden Zahnmesenchyms auch die sequenzielle Zahnbildung entlang der Zahnreihe reguliert. Dies wird durch weitere Analysen im Bmp4f/f bestätigt; Wnt1Cre Mäuse. Bmp4f/f. Wnt1Cre-Mäuse zeigen einen unterkieferförmigen Molaren-Entwicklungsstillstand im Knospenstadium, wodurch die Osr2-Gendosierung um 50 % der geretteten mandibulären ersten Molar-Zahnkeime auf kleine mineralisierte Zähne im Osr2+/-Bmp4f/f reduziert wird; Wnt1Cre Mäuse 93 (Abbildung 3H, I). Darüber hinaus haben sich die maxillären zweiten Molaren in der Msx1+/Bmp4f/f nicht entwickelt; Wnt1Cre Mäuse, sie wurden in der Osr2 +/ .Msx1 +/ Bmp4f/f gerettet; Wnt1Cre Mäuse (Abbildung 3E). Zusammen deuten diese Daten darauf hin, dass Osr2 das mesenchymale odontogene Feld entlang der buckolingualen und anteroposterioren Achsen mustert, indem es die Domäne der Msx1-vermittelten Ausbreitung des mesenchymalen odontogenen Potentials einschränkt (Abbildung 5). Säugetiere haben eine einzige Reihe von Zähnen entlang der oralen Rand des Oberen und Unterkiefers. Die Ahnenzahnformel der Plazentasäugetiere besteht aus drei Schneidezähnen, einem Eckzähne, vier Prämolaren und drei Molaren in jeder Hälfte des Kiefers 52. Im Vergleich dazu haben Menschen eine reduzierte Anzahl von Zähnen, aber immer noch eine vollständige Ergänzung der Zahntypen, während Mäuse nur einen Schneidezahn und drei Molaren, getrennt durch eine zahnlose Diastema, in jedem Kieferquadranten haben. Der Mangel an Zähnen in der Maus-Diastema-Region ist jedoch nicht auf den Mangel an Zahninitiation während der Embryogenese zurückzuführen.
Sorgfältige 3D-Rekonstruktionsanalysen histologischer Abschnitte und molekularer Markerstudien zeigten, dass sich mindestens zwei rudimentäre Knospen, die einen vorübergehenden Shh-Ausdruck aufweisen, in der Diastema-Region vor der ersten molaren Morphogenese in jedem Quadranten der embryonalen Mausbacken 52–55 bilden. In der Oberilla treten beide diastermale Zahnknospen, R1 und R2 genannt, durch Apoptose zurück. Während im Unterkiefer die vordere Knospe zurückgeht, wird die hintere Knospe, auch R2 genannt, nur vorübergehend von Apoptose beeinflusst und anschließend in den vorderen Teil des ersten Molaren 52–56 eingearbeitet. Diese transienten Zahnknospen, die vor den ersten molaren Zahnkeimen wirken, wurden als evolutionäre Überbleibsel von Prämolaren interpretiert, die während der Nagetierentwicklung 52–57 verloren gingen. Bemerkenswertist, prämolar-ähnliche überzählige Zähne vor den ersten Molaren wurden bei Mäusen berichtet, die verschiedene Mutationen tragen, die jeden der Bmp-, Fgf-, Shh- und Wnt-Signalwege beeinflussen56–61, die neue Einblicke in die komplexe Querregulation und Integration dieser Wege in die Regulierung der Zahnmorphogenese und -musterung liefern. Kurz vor dem Übergang der Zahnknospe in die Kappenstufe Der primäre Emailknoten bildet sich an der Spitze der Zahnknospe und zeigt eine eingeschränkte Expression mehrerer Mitglieder der Familien Bmp, Fgf und Wnt, einschließlich Bmp2, Bmp4, Bmp7, Fgf3, Fgf4, Fgf9, Fgf20, Wnt3, Wnt6, Wnt10a, Wnt10b, sowie Shh 4, 10–12, 17–21.